紫外可見分光光度計的結構主要是由電源、光源、單色器、樣品室、光電轉換器、前置放大器、數據處理、外圍設備等部分組成。
光 源：指的是發光的物體。理想的光源應能提供連續輻射，光的強度必須足夠大，并且在整個光譜區內其強度不應隨波長有明顯變化。當然理想的光源是不存在的，沒有那種光源能在所有波長點提供足夠強大而且穩定的光輻射。所以根據不同的波長，要采用不同的光源。
鎢燈：320－1100nm（可見區）
氘燈：190－ 400nm（紫外區）
單 色器：是一種用來把來自光源的混合光分解為單色光并能隨意改變波長的裝置。它主要有入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準直鏡組成，其中色散元件是最關鍵的，因為它的質量決定了單色器質量的優劣。
試 樣室：用來擱放測試樣品的一個暗盒裝置。
光電轉換器：把微弱的光信號轉變成微弱的電信號。能檢測通過測試溶液與參比溶液的光強度，并以電信號顯示出來，用于體現測試溶液與參比溶液的光強度比值。通常紫外可見分光光度計使用的檢測器有硅光電池、光電管和光電倍增管，今天由于半導體技術的迅速發展，光電池的性能越來越好，且光電倍增管的價格越來越低，所以光電管逐漸被淘汰了。
前置放大器：一般由高阻抗集成運算放大器組成，完成微電流(電壓)的放大。
直流穩壓電源：組成不同電壓(電流)的直流工作電源，滿足儀器各個負載需求。
顯 示器：LED、LCD電壓表組成。
分光光度計的理論依據是建立在光的吸收定律上的。光的吸收定律又稱：朗伯-比爾定律。
就是利用物質在光的照射激發下，具有選擇性吸收現象來對物質進行定性和定量分析。
I0：入射的單色光強度
T =I/I0×100％ I：出射的單色光強度
T：透射比強度（透光率），用百分數表示。
朗伯-比耳定律：A=KCL A=log1/T = -log T
A：吸光度（吸收比強度）
K：吸光系數
C：樣品的濃度（g/l）
L：比色皿的寬度（cm）
吸光度：當一束平行的單色光，垂直照射在均勻的被測樣品時，該樣品就有一定的吸收，樣品對入射光減弱吸收的程度，稱為吸光度，通過儀器便可測出，吸光度是沒單位的一個量。從以上公式中可以看出，當入射光強度一定時，物質的吸光度與物質中吸光物質的濃度和物質厚度的乘積成正比。
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